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    小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1elisa試劑盒操作步驟

    點擊次數(shù):652  更新時間:2022-02-24

    小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)elisa試劑盒操作步驟:


    1.         標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在、第二孔中分別加標準品100μl,然后在、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1800ng/L,1200ng/L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。


    2.         加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品*終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。


    3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。


    4.         配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。


    5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。


    6.         加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。


    7.         溫育:操作同3。


    8.         洗滌:操作同5。


    9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.


    10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。


    11.     測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

    ANKRD9錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體

    ANKS1A錨蛋白重復及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白1A抗體

    APM2脂肪特定轉(zhuǎn)錄因子2抗體

    APOL3載脂蛋白L3抗體

    ARMC3 (Cancer/testis antigen 81)腫瘤/睪丸抗原81抗體

    ATXN7L2共濟失調(diào)蛋白7樣2抗體

    ARSA芳香基硫酸酯酶1抗體

    ATE1精氨酸t(yī)RNA的蛋白轉(zhuǎn)移酶1抗體

    ATXN7L1共濟失調(diào)蛋白7樣1抗體

    AUTS2孤獨癥易感基因2蛋白抗體(自閉癥相關(guān)蛋白1)

    ATX2脊髓小腦共濟失調(diào)2型蛋白抗體

    ARSH芳香基硫酸酯酶H抗體

    ACF1溴區(qū)結(jié)構(gòu)域相鄰鋅指蛋白1A抗體

    Apo-1載脂蛋白1抗體

    Amisyn突觸融合結(jié)合蛋白6抗體

    Arginase 1精氨酸酶1抗體

    AKD1腺苷酸激酶結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體

    ABCA7三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白7抗體

    phospho-Na+/K+-ATPase Alpha1(Ser 943)磷酸化鈉鉀ATP酶α1多肽抗體

    ATP1A1Na+/K+-ATPase α1 鈉鉀ATP酶α1抗體


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