PCR檢測試劑盒原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,產(chǎn)品僅用于科研經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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注意事項:
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
阿米舒必利(標準品) * 規(guī)格:>98%,標準品純度:>95%
非諾貝特 * 規(guī)格:>98%,BR純度:>95%
非諾貝特(標準品) * 規(guī)格:HPLC>98%,標準品純度:>95%
鹽莫西沙星 * 規(guī)格:>99%,BR純度:>95%
鹽莫西沙星(標準品) * 規(guī)格:HPLC>98%,標準品純度:>95%
昔美沙美特羅 * 規(guī)格:>98%,BR純度:>95%
普生 * 規(guī)格:>99%以上,S構(gòu)型無結(jié)晶水純度:>95%
普生(標準品) * 規(guī)格:HPLC>98%,標準品純度:>95%
潑尼松 * 規(guī)格:>98%,USP30,BR純度:>95%
潑尼松(標準品) * 規(guī)格:HPLC>98%,標準品純度:>95%
強力霉素堿/強力霉素一水合物 * 規(guī)格:>900μg/mg,USP,BR,可用于細胞培養(yǎng)純度:>95%
唑來 * 規(guī)格:>99%,一水化合物,BR純度:>95%
唑來(標準品) * 規(guī)格:HPLC>98%,標準品純度:>95%
帕米二鈉 * 規(guī)格:>99%,五水合物純度:>95%
帕米二鈉(標準品) * 規(guī)格:HPLC>98%,標準品純度:>95%
慶大霉素 * 規(guī)格:>590IU/MG,BR純度:>95%
Adducin protein 內(nèi)收蛋白抗體 * 0.1ml Methotrexate
phospho-c-Jun(Thr91+Thr93) 磷原癌基因c-Jun抗體 * 0.1ml Methotrexate
Gibberellins 抗赤霉素抗體 * 0.1ml Nimesulide
phospho-AQP2(Ser264/261) 磷水通道蛋白2抗體 * 0.1ml Miconazole Nitrate
Mycobacterium bovis 牛結(jié)核桿菌菌體蛋白抗體 * 0.2ml Miconazole Nitrate
PCR檢測試劑盒CK12/Cytokeratin 12 細胞角蛋白12抗體 * 0.2ml Micronomicin Sulfate
HE4/Epididymal secretory protein E4 附睪分泌蛋白4抗體 * 0.2ml Micronomicin Sulfate
Beta galactosidase β半乳糖苷酶抗體 * 0.2ml 4-MUG
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