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細(xì)胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(BAI)生化檢測(cè)盒

型 號(hào)

產(chǎn)品時(shí)間2023-11-07

所屬分類蔗糖系列

報(bào)價(jià)300

產(chǎn)品描述:細(xì)胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(BAI)生化檢測(cè)試劑盒蔗糖轉(zhuǎn)化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和糖,是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)最適 pH,Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類型。

產(chǎn)品概述

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產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

細(xì)胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(BAI)生化檢測(cè)試劑盒

100/48 50/24   

EY-01S1225

 

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測(cè)定意義:

蔗糖轉(zhuǎn)化酶(InvertaseIvr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和糖,是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)最適 pH,Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類型。                         

AI的最適pH35。AI分為可溶性AI(S-AI)和細(xì)胞壁不溶性AIB-AI)兩種類型。B-AI存在于細(xì)胞間隙并結(jié)合在細(xì)胞壁上,主要參與韌皮部質(zhì)外體卸載時(shí)蔗糖的分解,以維持庫(kù)源之間蔗糖的濃度。

測(cè)定原理:

B-AI催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖,進(jìn)一步與3,5-二水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收增加速率與B-AI活性成正比。

自備用品:

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、





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試劑一:液體×1瓶,室溫保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。              

試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,現(xiàn)配現(xiàn)用。

試劑四:液體×1支,4℃保存。


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1、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測(cè)。

2、細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測(cè)。

3、血清等液體:直接測(cè)定。


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通用型HRPAEC底物顯色試劑盒

20毫升玻璃勻漿器

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(1)按照蛋白濃度計(jì)算

活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。

ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T

=1608×△÷Cpr

(2)按照樣本質(zhì)量計(jì)算

活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。

ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A÷W

(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

活性單位定義:25℃中每104個(gè)細(xì)胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。

ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細(xì)胞數(shù)量×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A ÷細(xì)胞數(shù)量

(4)按液體體積計(jì)算

活性單位定義:25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。

ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T

=1608×△A

ε:NADH摩爾消光系數(shù),6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光徑,1 cm;V反總:反應(yīng)體系總體積,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;V樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積,100μL=0.1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,1min。


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